分离病毒的材料应采自早期病例，以无菌操作采取扑杀的病鸡或新鲜病尸的脑、脾、肺等组织。采取病料的种类要根据不同的疾病性质而异。如：疑为新城疫的病鸡或病死鸡，可采取脑、脾、肺组织；疑为传染性喉气管炎的病鸡或病死鸡，可采取气管分泌物或气管等组织；疑为传染性支气管炎的病鸡或病死鸡，可用气管拭子的方法，也可采取肺、肾、输卵管等病变组织。器官组织标本，充分剪碎或经玻璃匀浆器研磨，用灭菌的生理盐水或PBS制成1∶10的悬液，并加双抗，每毫升含青霉素1000单位，链霉素1毫克。在冰箱置2小时。再以2000转／分离心10－15分钟，吸取上清液，供接种之用。气管分泌物、鼻液等标本中，常含有大量细菌，须作除菌处理，通常是加入青、链霉素各1000－2000单位／毫升，4℃感作4小时或过夜，2000转／分，离心20分钟，吸取上清液，供作接种用。