微嗜氧的弯杆菌属

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弯杆菌是含有人畜共患的微生物，有五个种及一些亚种。

1．胎儿弯杆菌(C．fetus)，有两个亚种。

(1)胎儿弯杆菌胎儿亚种(C．fetus subsp．fetus)，能致牛的传染性流产，可感染豚鼠、地鼠、鸡胚，可从流产胎儿胃、胎盘分得。

(2)胎儿弯杆菌维纳斯亚种(C．fetus subsp．venerealis)，引起牛、绵羊流产，感染人。

2．空肠弯杆菌(C．jejuni)，从流产绵羊羔胃、胎盘分得，还是人传染性肠炎的重要病原之一，从许多动物肠道(犊、犬、兔、猴、猫、鸡、火鸡、鸭、绵羊、山羊、鸽、山乌鸟、燕八哥)以及食品、水、生牛乳中分得。

3．大肠弯杆菌(C．coli)，从猪、人、禽消化道分得，是人类的腹泻病原。

4．痰弯杆菌(C．sputorum)有三个亚种。

(1)痰弯杆菌痰亚种(C．sputorum subsp．sputorum)，从人的齿龈间隙中分得。

(2)痰弯杆菌牛亚种(C．sputorum subsp．bubulus)，从正常牛羊的包皮、精液、阴道粘液中分得。

(3)痰弯杆菌粘膜亚种(C．sputorum subsp．mucosalis)，从患肠腺瘤、坏死性肠炎、局限性迥肠炎、增生性出血性肠道病变的病猪肠粘膜分得，也从猪口腔分出过。

5．简明弯杆菌(C．concisus)，从患齿龈炎、牙周炎、耳周炎病人的齿龈间隙分得。

一、弯杆菌属特性

(一)形态与染色 弯杆菌大小为0．5～5μm×0．2～0．5μm的细长杆菌，呈弧形，有时呈螺旋形可长达8μm，当两弧菌相联时可呈海鸥展翅形或S形，老年培养物可呈圆形体，菌体一端或两端有单鞭毛，长度为菌体的2～3倍，运动呈直线的螺旋形，不形成芽孢。革兰氏染色阳性。由于本菌着色力差，用沙黄很难着染，宜用0．06%石炭酸复红或1%碱性复红染色，也可用结晶紫等强染色剂染色。

(二)培养特性 弯杆菌为微嗜氧菌，在含有5%O₂、15%CO₂、和80%N₂的环境中生长良好。无氧或在大气中均不能生长。此菌只能在营养丰富的选择性培养基上生长，其中以Shirrow培养基、Butzler培养基及改良Campy-BAP培养基为佳。这些培养基皆以血琼脂为基础，加入多种抗菌素抑制其他肠道菌群，有利于本菌生长。(以上三种培养基制备方法附后)。培养最适温度为37℃，有些菌可在42℃或43℃、有的也可在25℃生长。

本菌的典型菌落呈白色、扁平、光滑、湿润、不溶血、有沿接种线扩散生长的趋势。

(三)生化特性 氧化酶及触酶试验阳性，不发酵糖类、不液化明胶、不水解尿素、M．R和V．P试验阴性。无脂酶活性。一般不产生色素。

(四)抵抗力 本菌对外界环境的抵抗力较强但对大多数抗生素敏感，对红霉素、氯清霉素、氯霉素、卡那霉素、妥布霉素、链霉素及庆大霉素均敏感。

(五)致病性 弯杆菌是一组人畜共患的致病微生物，其主要传染源是动物，常见于牛、绵羊、山羊、猪、狗和猫，其次是鸡鸭等家禽。由于弯杆菌种类较多，所致疾病的症状也各异，但以出现流产、腹泻、乳房炎和禽类的肝炎为主。

二、病原诊断

(一)标本的采集 采取病人或病畜服用抗生素前的腹泻粪便、肛拭、血液、新鲜的乳汁、痰、活检标本及疑为污染的肉食品等。

(二)标本运送、分离培养及菌种保存 一般在运送样品或检查生乳时，加入0．01%亚硫酸钠(SB)和0．15%硫乙醇酸钠(STG)或在绝对无氧(100%N₂)状态下4℃保存。本菌在人工培养基上易于失去活力。Balukrish(1984)报导一种以鸡蛋为基础的保种培养基(egg-based medium)于4℃保存本菌可达三月以上。Bailey(1982)认为标本在2～3h内若不能接种在增菌培养基上，应立即接种在Caiy-Blair运送培养基内放置4℃冰箱，争取于24小时内接种进行分离培养。

(三)初步鉴定 选择可疑菌落进行氧化酶和触酶试验用镜检细菌有无动力。用石炭酸复红或碱性复红染色后观察其特殊形态，如符合本菌特征者，一般可初步判断为弯杆菌。

(四)生化及血清学鉴定 在温度耐受试验中空肠弯杆菌能在42℃生长，而不能在25℃生长，但胎儿弯杆菌却相反，故42℃不生长时能排除胎儿弯杆菌。在3．5%食盐耐受试验中，仅痰弯杆菌牛亚种可生长，其余弯杆菌包括胎儿弯杆菌及空肠弯杆菌等均不生长。此外空肠弯杆菌可生长于1%甘氨酸培养基，能还原TTC形成紫色菌落。亚硝酸盐还原试验，胎儿弯杆菌为阳性，而痰弯杆菌阳性。

血清学鉴定及分型由于目前国内尚缺乏统一的标准分型血清，可应用分离的地方菌株免疫家兔，用交叉吸收制备各型抗血清，以此抗血清进行鉴定及分型。

(五)弯杆菌检查程序

Skirrow培养基制法如下。

表14-5 弯杆菌属的种和亚种

符号说明：空白表示缺资料；+表示90%以上菌株阳性；-表示90%以上菌株阴性；d表示11～89%的菌株阳性。

2号基础血琼脂(Oxoid)40克溶于1000ml蒸馏水中121℃灭菌15min后冷却至50℃再加入

万古霉素 10mg

多粘菌素B 2，500IU

三甲氧苄氨嘧啶 5mg

马血(将脱纤维蛋白马血经4次反复冻结和融解而成)70ml。

Butzler培养基的制法如下。

2号基础血琼脂(Oxoid)40克溶于1000ml蒸馏水中，121℃灭菌15min后冷却至50℃再加入

杆菌肽 25000IU

放线菌酮 50mg

粘菌素硫酸盐 10000IU

先锋唑啉钠 15mg

新生霉素 5mg

绵羊血 70ml

改良Campy-BAP选择培养基的制法如下。

胰蛋白胨(Oxoid) 10g

蛋白胨(Oxoid) 10g

葡萄糖 1g

酵母浸出液(国产) 5g

氯化钠 5g

偏重亚硫酸钠 0．1g

硫乙醇钠 1．5g

琼脂粉 15g

蒸馏水 1000ml

药品溶解后矫正pH至7．2～7．4，10磅20min灭菌，待培养基冷却至50℃左右加入

万古霉素 10mg

先锋霉素Ⅰ 15mg

多粘霉素B 2500IU

两性霉素B 2mg

脱纤维羊血 50ml