半纤维素的测定

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半纤维素是一些与纤维素一起存在于植物细胞壁的多糖的总称。不溶于水而溶于稀碱液，构成半纤维素的单体有葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖及糖醛酸等。

测定半纤维素可用沸腾的80%硝酸钙溶液除去淀粉，用水将可溶性的一些碳水化合物除去。将沉淀用蒸馏水洗涤后，用2N的盐酸(热盐酸)水解半纤维素，用斐林试剂滴定糖分，再乘以系数即得半纤维素含量。

试剂

(1)80%硝酸钙溶液：称200克硝酸钙〔Ca(NO₃)₂4H₂O〕加入蒸馏水溶解。并定容至250毫升。

(2)2N盐酸溶液：取16．8毫升浓盐酸(比重1．19)定容至100毫升容量瓶中。

(3)2N氢氧化钠溶液：称8克氢氧化钠溶于水并定容至100毫升。

(4)斐林试剂：

A液：称硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)15克，次甲基蓝0．05克，溶于1000毫升水中。

B液：称酒石酸钾钠50克，氢氧化钠54克，亚铁氰化钾4克，溶于1000毫升水中。

(5)标准葡萄糖溶液：将无水葡萄糖于105℃烘干至恒重，称取1克溶于水中，加盐酸5毫升，定容至1000毫升。

操作步骤

1．除去淀粉等杂质：称粉碎干燥样品0．2克，在研钵中加入5毫升80%硝酸钙溶液，研细，转入100毫升三角瓶中，用10毫升80%硝酸钙溶液冲洗研钵，将冲洗液合并到原来的溶液中，三角瓶口插一小漏斗(作回流用)，在电炉上加热至沸5分钟，取下加入20毫升蒸馏水。3000转／分离心5分钟，倒掉上清液，再加入10毫升热蒸馏水洗涤沉淀，离心，倒去上清液，如此重复三次。

2．水解半纤维素：将以上沉淀物转入试管中加入10毫升2N盐酸，口上插一小漏斗，置沸水上，搅拌几次，微沸45分钟。3000转／分离心5分钟，将上清液倒入50毫升容量瓶中，加水5毫升洗残渣离心，将上清液合并到原来的容量瓶中，如此洗三次。加入1滴酚肽，用2N氢氧化钠中和(约需10毫升)至显玫瑰色为止。加水稀释至刻度。过滤。待测。

3．滴定：用移液管取斐林试剂A液、B液各5毫升，再取上述样品滤液5毫升。置100毫升三角瓶中，用滴定管先加入一定量的标准葡萄糖液，混合后放在石棉网上加热至沸，再以每滴4～5秒的速度继续自滴定管滴入标准葡萄糖液至蓝色或紫红色消退为止。沸腾后加入的标准葡萄糖液量应在0．5～1．0毫升范围内，否则会影响结果，如超过或不足，则将沸腾前加入的标准葡萄糖液量酌情增减，至合适为止。沸腾前后二次用去的标准葡萄糖液的总量为V₂。不如样品的空白所用去的葡萄糖液总量为V₁。

4．计算：

式中：V₁：滴定斐林试剂A、B液各5毫升，空白试液5毫升所用标准葡萄糖液总毫升数；

V₂：滴定斐林试剂A、B液各5毫升，样品液5毫

升所用葡萄糖总毫升数；

：标准葡萄糖液每毫升含葡萄糖克；

50

：样液稀释倍数；

W：样品重量(克)；

0．9：已糖换算为半纤维素的系数；

100：换算为百分含量。