凝血酶(从动物血液中提取)

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制法

(1)分离血浆，提取凝血酶原 取动物血液，按每千克动物血液加3．8g柠檬酸三钠投料，搅拌均匀，装入离心管中，以3000r／min的速度离心15min，分出血球(可供制备血红素)，收集血浆。把血浆溶于10倍体积的蒸馏水中，用1%浓度的乙酸调节pH值至5．3，在离心机离心15min，弃去上清液，收集的沉淀物即为凝血酶原。

(2)凝血酶原的激活 在30℃条件下，将凝血酶原溶于1～2倍体积的0．9%氯化钠溶液中，搅拌均匀，加入占凝血酶原质量1．5%的氯化钙，搅拌15min，在4℃下放置1．5h左右，保证凝血酶原转化为凝血酶。

(3)沉淀分离凝血酶 将激活的凝血酶溶液用离心机离心15min，弃去沉淀。上清液移入搪瓷桶中，加入等量的预冷至4℃的丙酮，搅拌均匀，在冷处静置过夜，然后用离心机分离，收集沉淀，上清液可供回收丙酮。沉淀用丙酮洗涤并研细，在冷处静置3d左右，然后过滤，沉淀分别用乙醇和乙醚洗涤一次，放置在干燥器或石灰缸中干燥，即得凝血酶粗品。

(4)除杂，沉淀，干燥 把粗品溶于适量(1倍质量左右)的0．9%氯化钠溶液中，在0℃放置6h以上，然后用滤纸过滤，滤出的沉淀再用1倍质量的0．9%氯化钠溶液溶解，在0℃放置6h以上，过滤，合并两次滤液，用1%乙酸溶液调节pH值为5．5。然后离心，弃去沉淀，收集上层清液。在清液中加入2倍体积预冷至4℃的丙酮，静置3h，离心30min，收集沉淀。沉淀再浸泡于冷丙酮中，静置过夜，然后过滤，沉淀分别用无水乙醇、乙醚洗涤一次，干燥即得产品。

凝血酶在临床上应用广泛，常以干粉或溶液局部涂于伤口及手术处，控制毛细血管血液渗出。在外科手术中已广泛应用。