20%胆汁(或2%胆盐)刺激生长试验

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1．原理 胆汁能抑制许多厌氧菌的生长，因为胆盐可降低细胞膜的表面张力，从而损伤其细胞膜。但有的厌氧菌含有胆盐分解的酶类，能利用胆汁作为营养物质，故生长旺盛。

2．方法 分为试管法和纸片法(质控以脆弱类杆菌ATCC 25285为准)。

(1)试管法：将待检细菌以相同的菌量接种至含20%胆汁的BHI培养基和不含胆汁的BHI的对照管，或用2%胆盐BHI试验也可。

结果判断：胆汁的BHI管生长旺盛为阳性，刺激生长；胆汁BHI管不生长为阴性，抑制生长。不含胆汁BHI管为对照，多为一般生长记为+。

(2)纸片法：取牛胆粉250mg，磷酸氢二钠7．6mg，磷酸二氢钾1．8mg，蒸馏水0．5mg，混匀后，加入100mm直径的滤纸1片，浸入上述溶液中，吸干溶液后，晾干，置干燥缸内保存备用。

将含菌量为10⁸CFU／ml滴于BHI血平板上0．1ml，用灭菌L棒涂匀，贴上含牛胆粉纸片1张，37℃培养24～48小时。

结果判断：纸片周围长满细菌者为胆汁刺激生长或耐胆汁。纸片周围有1mm以上的抑菌环者，则为胆汁试验抑制菌生长。

3．意义 刺激生长的主要脆弱类杆菌中的脆弱、普通、吉氏、卵形类杆菌和内脏类杆菌。而多形、单形、埃氏类杆菌较大量生长；腐败类杆菌、小梭形类杆菌、超巨类杆菌在胆汁中能生长，锐利类杆菌和凝固类杆菌对胆汁敏感，生长不定。其他菌多被胆汁抑制生长。