(3)玉米籽粒、植株和土壤中残留量检测方法

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北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 王漫琳 夏福利

样本用石油醚提取，中性氧化铝／弗罗里硅土柱层析净化，气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

植物样品粉碎机

康氏振荡器

旋转蒸发器

超声波清洗器

层析柱 Φ12mm×300mm

2．主要试剂

甲醇、石油醚、丙酮、乙酸乙酯、磷酸、545助滤剂、氯化钙、氯化铵、无水硫酸钠

凝结液 10mL磷酸／5g氯化铵／1000mL水

乙草胺标准品

3．检测步骤

3．1 提取与液-液分配

3．1．1 玉米植株

取10g粉碎样本于250mL的三角瓶中，加入80mL丙酮(干样需加水1．5mL)，振荡提取40min，抽滤，用50mL丙酮清洗滤渣。合并滤液，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至40mL左右。加入1g545助滤剂及40mL凝结液，摇匀，放置10min，抽滤，用40mL丙酮／凝结液(1∶1，V／V)清洗滤渣并过滤，合并滤液。将滤液转入250mL分液滤斗中，用50mL、40mL、30mL石油醚萃取3次，合并石油醚相，经无水硫酸钠滤斗脱水后，用旋转蒸发器(40℃)浓缩近2mL左右，待净化。

3．1．2 玉米籽粒

取25g粉碎样本于250mL的三角瓶中(成熟干样需加水15mL)，加30mL丙酮、45mL0．5%氯化钙溶液，振荡40min，抽滤，用50mL丙酮／水(5∶2，V／V)溶液清洗滤渣。合并滤液，加入45mL0．5%氯化钙溶液，用50mL、40mL、30mL石油醚萃取，合并石油醚相，经无水硫酸钠过滤脱水后，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至2mL左右。

3．1．3 土壤

称取25g样本(干土需加水3mL)于250mL的三角瓶中，加50mL甲醇，振荡1h，加少量助滤剂545抽滤，用30mL甲醇清洗滤渣，合并滤液，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至10mL左右。将滤液转移至250mL分液漏斗中，加入60mL1%氯化钙溶液，用30mL、20mL、20mL石油醚萃取，合并石油醚相，经无水硫酸钠滤斗脱水后，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至2mL左右。

3．2 净化

3．2．1 玉米植株、玉米籽粒

在层析柱内依次填装少许无水硫酸钠、7g中性氧化铝／弗罗里硅土(2∶1，W／W)、0．3g活性炭粉／助滤剂545(1∶5，W／W)、少许无水硫酸钠，用30mL6%乙酸乙酯石油醚预淋层析柱，将上述浓缩液转移至柱顶，用6%乙酸乙酯石油醚溶液淋洗，弃去前25mL，收集后45mL洗脱液，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干，用石油醚定容至10mL，待测。

3．2．2 土壤

在层析柱内依次填装少许无水硫酸钠、7g中性氧化铝／弗罗里硅土(2∶1，W／W)、少许无水硫酸钠，用30mL5%乙酸乙酯石油醚溶液预淋层析柱，将上述浓缩液，用5%乙酸乙酯石油醚溶液淋洗，弃去前25mL，收集后55mL洗脱液，用旋转蒸发器(40℃)浓缩至干，用石油醚定容至10mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 2mmi．d．×1．5m玻璃内衬不锈钢柱，5%OV-17／Chromosorb WHP，80～100目

检测温度 柱温195℃；进样口250℃；检测器250℃

载气 高纯氮，40mL／min

进样量 5μL

保留时间 3．7min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．25×10^－1⁰g。

最低检测浓度 玉米籽粒、土壤0．01mg／kg，植株0．025mg／kg。

回收率 玉米籽粒及土壤中添加乙草胺0．047～1．186mg／kg时，平均回收率为86．2%～98．1%；植株中添加乙草胺0．030～1．186mg／L时，平均回收率为83．0%～90．7%。见表3-2-3。

相对标准偏差 2．0%～5．6%，见表3-2-3。

表3-2-3 玉米植株、玉米籽粒和土壤中乙草胺添加回收率及相对标准偏差实验结果