黄瓜和土壤中残留量检测方法

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化学工业农药安全评价质量监督检验中心 王立东 李柏余 陈光 刘宁 吴剑英

样本用丙酮提取，二氯甲烷液-液分配，中性氧化铝柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

组织捣碎机

往复式振荡器

真空泵

旋转蒸发器

2．主要试剂

乙腈(色谱纯)、丙酮、二氯甲烷、二次蒸馏水、氯化钠、无水硫酸钠

中性氧化铝 加5%水减活

烯肟菌酯标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 黄瓜

准确称取100g样本，加入100mL丙酮，低速匀浆0．5min后再高速匀浆1min，抽滤。用少量丙酮分两次洗涤捣碎缸及残渣。合并滤液于250mL容量瓶中，定容至刻度。

3．1．2 土壤

称取20g经碾碎、混匀并过筛的土壤样本，装入250mL磨口锥形瓶中，用50mL×2丙酮振荡提取，每次1h，抽滤，合并滤液。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

用移液管吸取25mL黄瓜提取液(土壤样本取全部滤液)，转移到500mL分液漏斗中，加入200mL4%氯化钠溶液。用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取，每次2min。合并二氯甲烷相于250mL磨口的锥形瓶中，加入10g无水硫酸钠，摇动片刻，静置30min脱水。用旋转蒸发器(50℃)浓缩至5mL，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中先加入二氯甲烷，再依次加入2cm无水硫酸钠、5g中性氧化铝和2cm无水硫酸钠，将液面降至柱填充物表面。将样本浓缩液加入柱中，用15mL二氯甲烷淋洗液洗脱于100mL的圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(50℃)浓缩至近干。用10mL乙腈溶解并经0．45μm滤膜过滤，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 时间编程，前段260nm，后段290nm

色谱柱 柱1 LiChroCART@250-4 RP-18，250mm×4mm，5μm

柱2 LUNAODS(2)，250mm×4．6mm，5μm

柱箱温度 30℃恒温

流动相 0～20min乙腈／水(65∶35，V／V)，22～32min乙腈100%

流速 1mL／min

进样量 5μL

保留时间(烯肟菌酯的4个异构体)

柱110．0min，11．4min，15．4min，17．5min

柱210．9min，12．5min，17．1min，19．3min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．25×10^－10g。

最低检测浓度 黄瓜0．05mg／kg，土壤0．0025mg／kg。

回收率 黄瓜中添加烯肟菌酯0．05～2．00mg／kg时，平均回收率为80．8%～82．9%；土壤中添加烯肟菌酯0．05～5．00mg／kg时，平均回收率为80．9%～85．4%。见表2-28-1、表2-28-2。

相对标准偏差 2．8%～6．9%，见表2-28-1、表2-28-2。

表2-28-1 黄瓜和土壤中烯肟菌酯E体添加回收率及相对标准偏差实验结果

6．黄瓜和土壤中烯肟菌酯液相色谱测定谱图

见图2-28-1。