(2)花生仁、壳、植株和土壤中残留量检测方法

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山东省农业科学院植物保护研究所 于建垒 宋国春

花生植株、壳用丙酮提取，花生仁用乙腈提取，柱层析净化；土壤用丙酮提取，液-液分配净化，气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

旋转蒸发器

超声波清洗器

小型真空泵

恒温水浴锅

匀浆机

层析柱 Φ15mm×250mm

2．主要试剂

丙酮、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、氯化钠、无水硫酸钠、中性氧化铝、活性炭

甲拌磷标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 花生植株、壳

称取10g切碎的样本于250mL碘量瓶中，加80mL丙酮，浸泡过夜。超声波提取15min，过滤。滤渣中加入80mL丙酮，超声波提取15min，过滤。滤渣用40mL丙酮分3次洗涤。合并滤液于500mL分液漏斗中，待净化。

3．1．2 花生仁

称取10g经组织捣碎的样本于250mL碘量瓶中，加20mL水、80mL乙腈，超声波提取15min。加入氯化钠使水饱和，水与花生仁粉形成浆状而与乙腈分层。乙腈层经无水硫酸钠过滤于250mL平底烧瓶中。滤渣用40mL乙腈分3次洗涤。合并滤液，减压浓缩(65℃)至2～3mL，待柱层析净化。

3．1．3 土壤

称取25g样本于250mL碘瓶中，用50mL×2丙酮，超声波提取，每次15min，过滤。滤渣用30mL丙酮分3次洗涤，合并滤液于250mL分液漏斗中。

3．2 净化

3．2．1 花生植株、壳

向分液漏斗中加入70mL5%NaCl溶液，用50mL、25mL、25mL正己烷萃取。合并正己烷相于250mL圆底烧瓶中，减压浓缩(65℃)至近干，待柱层析净化。

在层析柱中自下而上依次装入2cm无水硫酸钠、5g中性氧化铝与0．2g活性炭混合吸附剂和2cm无水硫酸钠，用50mL二氯甲烷预淋，弃去。移入浓缩提取液，用70mL二氯甲烷／乙酸乙酯(20∶1，V／V)洗脱，收集全部洗脱液。于60℃下减压浓缩至干，用正己烷定容至10mL，待测。

3．2．2 花生仁

柱层析净化操作同植株与壳，混合吸附剂改为8g中性氧化铝和0．32g活性炭。

3．2．3 土壤

向分液漏斗中加入70mL5%NaCl溶液，用50mL、25mL、25mL正己烷萃取。合并正己烷相于250mL圆底烧瓶中，减压浓缩(65℃)至近干，用正己烷定容至25mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 0．53mm×30m毛细管石英柱，内涂弱极性混合固定液

检测温度 柱温170℃；进样口250℃；检测器230℃

载气 高纯氮，45mL／min

分流比 4∶1

保留时间 10．5min左右

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－10g。

最低检测浓度 0．01mg／kg。

回收率 土壤、花生植株、花生壳和花生仁中添加甲拌磷0．05～1．0mg／kg时，平均回收率分别为89．4%～94．7%、90．5%～102．8%、87．3%～91．7%和86．0%～90．6%。见表1-27-2。

相对标准偏差 2．4%～5．5%，见表1-27-2。

表1-27-2 花生植株、壳、仁和土壤中甲拌磷添加回收率及相对标准偏差实验结果