(2)甘蔗和土壤中残留量检测方法

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广东省农业科学院植物保护研究所 孙海滨

样本中丁硫克百威和克百威用甲醇和缓冲溶液提取，3-羟基克百威用盐酸溶液回流提取，液-液分配，气相色谱法(NPD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 氮磷检测器(NPD)

旋转蒸发器

高速组织捣碎机

2．主要试剂

甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、十二烷基磺酸钠、无水硫酸钠

缓冲溶液 4．925g磷酸氢二钾和0．465g磷酸二氢钾溶于水并定容至200mL

丁硫克百威标准品、克百威标准品、3-羟基克百威标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 甘蔗中丁硫克百威、克百威的提取

称取捣浆好的净重样本20．0g，置于250mL三角瓶中，加入8mL缓冲液、10mL水和80mL甲醇，浸泡4h，振荡提取30min，抽滤。滤渣再用80mL甲醇振荡提取并抽滤，合并抽滤液。

3．1．2 甘蔗中3-羟基克百威的提取

称取净重10．0g样本，置于250mL圆底烧瓶中，加入150mL0．25mol／L盐酸溶液，在95℃下加热回流1h，抽滤。

3．1．3 土壤中丁硫克百威、克百威、3-羟基克百威的提取

称取20．0g样本，放入250mL三角瓶中，加入8mL缓冲液、10mL水和80mL甲醇，浸泡4h后，振荡30min，经助滤剂层抽滤。滤渣用80mL甲醇振荡提取并抽滤，合并滤液。

3．2 净化

3．2．1 甘蔗中丁硫克百威、克百威的净化

将滤液移入500mL分液漏斗中，加入50mL饱和氯化钠溶液和100mL水，用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器(50℃)浓缩至少许，经气流吹干，用乙酸乙酯定容，待测。

3．2．2 甘蔗中3-羟基克百威的净化

将滤液移入500mL分液漏斗中，加入100mL水、30g氯化钠和1mL4%十二烷基磺酸钠溶液，用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器(50℃)浓缩至少许，经气流吹干，用乙酸乙酯定容，待测。

3．2．3 土壤中丁硫克百威、克百威、3-羟基克百威的净化

将滤液移入500mL分液漏斗中，加50mL饱和氯化钠溶液和100mL水，用50mL×3二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器(50℃)浓缩至少许，经气流吹干，用乙酸乙酯定容，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 NPD

色谱柱 HP-1，15m×0．53mm

检测温度 柱温150～250℃程序升温；进样口250℃；检测器250℃

载气 高纯氮，6psi

燃烧气 空气60psi，氢气5psi

进样量 2μL

保留时间 丁硫克百威15．6min，克百威7．2min，3-羟基克百威8．9min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 5×10^－11g。

最低检测浓度 0．005mg／kg。

回收率 甘蔗和土壤中添加丁硫克百威、克百威和3-羟基克百威0．01～1．0mg／kg时，甘蔗中平均回收率分别为78．4%～86．6%、83．2%～89．6%和80．1%～85．6%；土壤中平均回收率分别为84．5%～87．9%、82．4%～88．8%和76．1%～81．3%，见表1-6-4。

相对标准偏差 1．3%～10．6%，见表1-6-4。

表1-6-4 甘蔗和土壤中丁硫克百威、克百威和3-羟基克百威添加回收率及相对标准偏差实验结果