(1)荔枝和土壤中残留量检测方法

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广东省农业科学院植物保护研究所 孙海滨

样本用丙酮提取，二氯甲烷液-液分配，弗罗里硅土柱层析净化，气相色谱法(NPD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 氮磷检测器(NPD)

高速组织捣碎机

高速分散均质机

旋转蒸发器

恒温水浴槽

层析柱 Φ10mm×210mm

2．主要试剂

丙酮(HPLC)、丙酮、二氯甲烷、无水硫酸钠、弗罗里硅土(Florisil)、活性炭

三唑酮标准品、三唑醇标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取20g(净重)匀浆果肉样本(全果20g、果皮10g、土壤20g)，放入玻璃三角瓶中，加入80mL丙酮，匀浆10min，振荡30min提取，经助滤剂抽滤。滤渣60mL丙酮振荡提取，抽滤。合并抽滤液，用旋转蒸发器(60℃)减压抽去大量丙酮。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将提取浓缩液移入500mL分液漏斗中，加入30mL饱和氯化钠水溶液，用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器(40℃)减压浓缩至少许。

3．2．2 柱层析净化

分别称取6g弗罗里硅土和1g活性炭依次装入层析柱中，柱顶端加1cm厚的无水硫酸钠层。用少许二氯甲烷将提取浓缩液移入层析柱中，用60mL二氯甲烷／丙酮(95∶5，V／V)混合溶剂洗脱。收集洗脱液，用旋转蒸发器(40℃)减压浓缩至少许，经气流吹干后，用丙酮1mL定容，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 NPD

色谱柱 DB-210，30m×0．32mm毛细管柱

检测温度 柱温160～260℃程序升温；进样口230℃；检测器260℃

载气 高纯氮10psi

燃烧气 空气60ml／min，氢气40ml／min

进样量 2μL

保留时间 三唑酮10．8min，三唑醇11．7min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

三唑酮总残留量=三唑酮残留量+三唑醇残留量折算的三唑酮残留量

三唑醇残留量折算成三唑酮残留量=三唑醇残留量×0．993

0．993=MW293．8／MW295．8

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－10g。

最低检测浓度 0．01mg／kg。

回收率 荔枝全果、果肉和土壤中添加三唑酮0．02～2．00mg／kg时，回收率为80．1%～93．5%；荔枝全果、果肉和土壤中添加三唑醇0．02～2．00mg／kg时，回收率为67．3%～81．4%。见表2-32-1。

相对标准偏差 1．6%～7．1%，见表2-32-1。

表2-32-1 荔枝和土壤中三唑酮和三唑醇添加回收率及相对标准偏差实验结果