高温灭菌

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利用热能灭菌的技术称为高温灭菌，又称加热灭菌。

在影响微生物生命活动的各种物理因素中，温度是最重要的因素之一。超过微生物生长繁殖的最高温度范围以后，很容易使微生物死亡。

死亡的原因是因为高温能使原生质中的蛋白质变性或凝固，同时也能破坏酶的活性，使代谢受阻导致微生物死亡。根据加热的方式不同，不可分为干热灭菌和湿热灭菌二类。

(1)干热灭菌法 指利用干热的空气进行灭菌的方法。由于空气的传热性能和穿透力比饱和蒸气差，菌体在脱水的情况下又不易被热杀死，所以一般烤箱温度升至160℃－170℃，1－2小时才能达到彻底灭菌的目的。

此法常用于玻离器皿、金属用具及其他干燥耐热物品。其优点可使灭菌器皿保持干燥。

(2)湿热灭菌法 利用煮沸或饱和水蒸汽等湿热进行灭菌的方法。由于菌体蛋白的凝固温度，随其含水量的大小而有所不同，菌体蛋白质的含水量愈高，其凝固温度愈低，蒸汽冷凝时又能放出大量潜热，因此湿热灭菌所需温度低于干热灭菌。

又由于水和蒸汽比空气导热快，蒸汽的穿透力比热空气强，灭菌时间相对也短。在微生物实验、医疗保健及工业生产中，常用的湿热灭菌有以下几种：

❶ 高压蒸汽灭菌法 又称饱和蒸汽灭菌法，是最常用的一种灭菌方法。

利用水的沸点随水蒸汽压力的增加而上升，从而达到高温灭菌的目的。高压蒸汽灭菌的装置是高压灭菌锅。一般物品，培养基1公斤／cm²(相当于121℃)保持15－20分钟即可达到灭菌的目的。

❷ 煮沸消毒法 直接把消毒物品放入水中煮沸5分钟以上，就可杀死全部细菌的营养细胞和部分芽孢。

如水中加入1%碳酸钠，灭菌效果会更好，此法适用于注射器、毛巾、病人衣物及解剖用具的消毒。

❸ 间歇灭菌法 利用水蒸汽把培养基加热到100℃，分几次蒸煮以达到彻底灭菌又保护培养基成份的目的。

间歇灭菌装置又称阿诺氏灭菌器。一般适用于不耐热的药品、怕高温的营养物质和牛奶培养基等的灭菌。

❹ 巴氏消毒法 这是一种杀死致病菌又保护营养成份不变的消毒方法，常用于牛奶、啤酒等消毒。一般在50℃一60℃条件下加热30分钟，牛奶、饮料中的病原菌(结核、白喉等致病菌)被杀死，但牛奶的营养成分和饮料的风味却不破坏。

此法由巴斯德发现，故又称巴斯德灭菌法。